GB/T 15441-1995 水质 急性毒性的测定 发光细菌法
1 主题内容与适用范围
1.1 主题内容
本标准规定厂测定水环境急性毒性的发光细菌法。
1.2 适用范围
本标准适用于工业废水、纳污水体及实验室条件下可溶性化学物质的水质急性毒性监测。
2 方法提要
基于发光细菌相对发光度与水样毒性组分总浓度呈显著负相关（P≤0. 05)，因而可通过生物发光光度计测定水样的相对发光度，以此表示其急性毒性水平。
水质急性毒性水平按8所述条件选用相当的参比毒物氯化汞浓度（以mg/L为单位）来表征，或选用EC50值（半数有效浓度―以样品液百分浓度为单位）来表征。
3 试剂和材料
本标准所用试剂除另有说明外，均应为符合国家标准的分析纯试剂、蒸馏水或同等纯度的水。
3.1 氯化汞HgCl2。
3.2 氯化钠NaCl，化学纯。
3.3 明亮发光杆菌T3小种（Photobacterium phosphoreum T3 app.)冻干粉，安瓶瓶包装，每瓶0.5 g，在 2-5℃冰箱内有效保存期为6个月。新制备的发光细菌休眠细胞（冻干粉）密度不低于每克800万个细胞；当按6. 2. 4步骤将冻干粉复苏2 mm后即发光（可在暗室内检验，肉眼应见微光），稀释成工作液后每毫升菌液不低于1. 6万个细胞(5 ml测试管）或2万个细胞(2ml测试管）（均为稀释平板法测定）。在毒性测试仪上测出的初始发光量应在600-1900mV之间，低于600mV允许将倍率调至"X2”档，高于1900 mV允许将倍率调至“X0.5"档。仍达不到标准者，更换冻干粉。
3.4 氯化钠溶液，3 g/100ml。
氯化钠3g于玻璃容器内，用量筒加蒸馏水100ml。
3.5 氧化钠溶液，2g/l00ml。
氯化钠2g，加蒸馏水100 ml，于试剂瓶内，2-5℃保存。
3.6 参比毒物氯化汞标准溶液。
0.02,0.04,0.06,0.08,0.10,0.12,0.14,0.16,0.18,0.20,0.22,0.24 mg/L。
3.7 氯化汞母液,ρ=2000mg/L。
万分之一分析天平精称密封保存良好的无结晶水氯化汞0.1000g入50ml容量瓶，用3g/100ml 氯化钠溶液稀释至刻度，置2-5℃冰箱备用，保存期6个月。
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